TRABAJO PRACTICO N° 10

Nota: a fin de facilitar el estudio, al final de cada unidad temática se indican las fuentes bibliográficas (u otras) que deberán ser consultadas.

I)INTRODUCCION A LA GENETICA MOLECULAR

• Acidos nucleicos: componentes químicos. Estructura del ADN según el modelo de Watson y Crick Estructura del ARN. Tipos de ARN. Diferencias entre el ADN y el ARN. ( De Robertis, cap 2).
• Organización funcional del material genético: concepto de genoma. Secuencias de ADN no repetidas y poco repetidas. ADN repetitivo (De Robertis, cap 12). Concepto molecular de gen. Estructura básica de un gen: promotor, secuencias reguladoras (amplificadores e inhibidores), segmento codificador (exones e intrones), secuencia de terminación (De Robertis, cap 13).

II)PROCESOS QUE EXPERIMENTAN LOS ACIDOS NUCLEICOS

• Replicación del ADN: concepto. Etapa del ciclo celular en que ocurre. Replicación semiconservadora y bidireccional. Concepto de origen, burbuja y horquilla de replicación. Descripción del proceso de replicación: diferencias en la síntesis de las dos cadenas nuevas (cadena continua o adelantada y cadena discontinua o retrasada). Fragmentos de Okazaki. Cebadores o "primers". Proteínas que intervienen en la replicación: helicasa, proteínas SSB, ADN primasa, ADN polimerasas , ADN ligasa. Función de cada una de ellas. Síntesis del ADN telomérico (De Robertis, cap 17).
• Transcripción del ADN o síntesis de ARN: concepto. Descripción del proceso: sentido de la síntesis, burbuja de transcripción. Cadena transcripta y cadena no transcripta.Función de las ARN polimerasas I; II y III. Concepto y función de: secuencias reguladoras, promotor, secuencia de terminación, transcripto primario, factores de transcripción basales y específicos (De Robertis, cap. 13 y 14).
• Procesamiento del transcripto primario: concepto. Concepto de: adición del capuchón, poliadenilación, corte y empalme y metilación de los ARN mensajeros. Rol de las ribonucleoproteínas pequeñas nucleares (RNPpn) (De Robertis, cap 15).
• Cambios en la tensión de la hélice de ADN: concepto. Rol de las topoisomerasas (De Robertis, cap 17).
• Recombinación del ADN: concepto. Función de las recombinasas y resolvasas (Solari, cap.9)
• Mutación del ADN: concepto. Ejemplos de mutágenos físicos, químicos y biológicos (transposones). Mutaciones espontáneas e inducidas. Mutaciones somáticas y germinales. Mutaciones puntuales: sustituciones, inserciones y deleciones. Mutaciones de más de una base (subcromosómicas o segmentarias): inserciones y deleciones. Efecto de las mutaciones en las secuencias codificantes (mutaciones sin sentido, con cambio de sentido, con cambio del marco o pauta de lectura, silenciosas). Efecto de las mutaciones en las secuencias no codificantes (mutación del promotor, de secuencias reguladoras, de sitios de corte y empalme). Otras mutaciones: transposones, repeticiones expandidas de tripletes. Concepto de mutaciones cromosómicas. (Jorde, cap3).
• Reparación del ADN: concepto. Lectura de prueba por la ADN polimerasa. Reparación mediante nucleasa reparadora. Eliminación de hipoxantinas y uracilos introducidos por desaminación. Reparación en casos de desaminación. Eliminación de dímeros de timina. Lesiones que se reparan y enzimas que intervienen en cada caso(De Robertis, cap.17).
• Metilación del ADN: concepto. Efectos de la misma. Mantenimiento de los patrones de metilación en sucesivas generaciones celulares. (De Robertis, cap.14). Metilación e impronta genómica ( Solari, cap 9)
• Traducción del ARN o síntesis proteica: concepto. Función de los diversos tipos de ARN. Descripción general del código genético. Etapas de iniciación, alargamiento y terminación de la traducción (De Robertis, cap 13 y 16)
• Flujo de la información genética y control de la expresión génica: Etapas en las que se puede controlar la expresión génica en eucariotas. (Alberts, cap 9)

III) TECNICAS BASICAS DE GENETICA MOLECULAR

• Breve descripción y aplicación de las siguientes técnicas: digestión enzimática (concepto y utilidad de las enzimas de restricción). Separación electroforética. Northern y Southern blot. Sondas de ADN genómico, ADN complementario y de ARN: concepto y utilización. Análisis de polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP). Secuenciamiento del ADN. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). (Jorde, cap 3)

BIBLIOGRAFIA

• Genética Humana. Fundamentos y aplicaciones en Medicina, 3ª. Edición. A. J. Solari. 2005.
• Genética Médica, 1ª. Edición. L.B. Jorde, J. Carey, R. White.
• Fundamentos de Biología Celular y Molecular, 4ª Edición. E. De Robertis, J. Hib.
• Clases teóricas.
• Aula virtual, página web de la Cátedra: www.biolme.4d2.net