microscopia

A) La biología celular tuvo sus inicios en el año 1838 cuando Schneider y Schwan propusieron su “Teoría celular” basados en investigaciones realizadas gracias al Microscopio óptico. Casi un siglo después (1931) Ruska y col. construyeron el primer Microscopio electrónico, que permitió conocer más íntimamente la estructura celular.

En la actualidad existen diversos tipos de M.O. y M.E. diseñados para la observación de las células en diferentes condiciones.(Por ej. microscopio de contraste de fase)

Aunque no siempre es necesario un tratamiento previo del material a observar, en la mayoría de los casos este debe ser sometido a distintas técnicas de preparación, que varían según el tipo de microscopio a usar.

Los instrumentos ópticos no solo se utilizan en investigación básica, sino que en muchos casos permiten hacer un diagnóstico preciso de distintas enfermedades (cáncer, enfermedades hematológicas, infecciones por parásitos, bacterias, virus, etc.).

1- ¿Cuál de los siguientes características de los M.O. y M.E. es incorrecta?
	a. El L.R. del M.O. está entre 0.18 – 0.25 um. b. En el M.O. se pueden observar células vivas o muertas. c. El M.E. está formado por un sistema de lentes de alta resolución . d. El límite de resolución del M.E. esta entre 3-5 Aº (angstron)
2- ¿Cuál de las siguientes frases define mejor el poder de resolución?.Marca la opción correcta.
	a. Es la mínima distancia entre dos puntos para que la lente los muestre separados. b. Es la mayor distancia entre dos puntos para que la lente los muestre separados. c. Es la capacidad de una lente de captar mas o menos rayos para la formación de la imagen. d. Es la capacidad de un instrumento óptico para mostrar puntos vecinos como entidades diferentes.
3-¿ Cuál de las siguientes frases referidas a límite de resolución (LR) y apertura numérica ( A.N.) es incorrecta?.
	a. A mayor poder de resolución menor AN. b. Para aumentar la A.N. se utiliza aceite de cedro. c. A mayor A.N. se obtiene menor L.R. d. Para aumentar el P.R se debe disminuir el L.R.
4- Se necesita observar los detalles de los ojos de una mosca. ¿Qué instrumento óptico utilizaría para tal fin ? Marca la opción correcta.
	a. Microscopio optico de campo claro. b. Microscopio óptico de fluorescencia. c. Lupa compuesta d. Microscopio electrónico de barrido.
5- Un laboratorista prepara su microscopio óptico de campo claro para analizar un frotis de sangre. Selecciona el objetivo necesario para observar la imagen de los leucocitos aumentada 400 veces. ¿Cuáles serán los aumentos propios del ocular que tenía colocado el microscopio y del objetivo que seleccionó ? Marca la opción correcta.
	a. 10x y 100x respectivamente. b. 10x y 40x respectivamente. c. 10x y 10x respectivamente. d. 5x y 40 x respectivamente.

6- ¿Cual de los siguientes tipos de M.O. permiten poner en evidencia, mediante el uso de rodamina, estructuras específicas de diferentes tejidos?. Marca la opción correcta.
	a. M.O. de campo claro. b. M.O. de fluorescencia. c. M.O. de contraste de fase d. M.O. de fondo oscuro.
7- En la microfotografía que se muestra a continuación, puedes observar células con el núcleo coloreado intensamente con sustancias fluorescentes. Para que estas sustancias exhiban este color brillante es necesario que sus moléculas sean excitadas por rayos de determinada longitud de onda. Marca la opción correcta.

1- La técnica de autorradiografía permite...... (marca la opción correcta)
	a. determinar la composición química de los lisosomas. b. estudiar la ultraestructura de lo microtúbolos citoplasmáticos. c. definir la ubicación de las proteínas en la membrana plasmática. d. determinar el destino del RNA una vez sintetizado en el núcleo..
2- La técnica de fraccionamiento celular permite...... (marca la opción correcta)
	a. la separación de vesículas de REL y RER. b. observar el movimiento de los cromosomas anafásicos. c. determinar la ubicación de las proteínas de la membrana plasmática. d. determinar el camino intracelular de una proteína de secreción.
3- Se estudia una muestra de intestino de ratón, alimentado exclusivamente con leche de soja, durante dos meses, después del destete. El objetivo del investigador es determinar la incidencia de la dieta en la constitución de la uniones oclusivas. ¿Cuál de las siguientes técnicas sería apropiada para determinar si existen anomalías en la disposición de las proteínas transmembranosas de estas uniones?. Marca la opción correcta.
	a.Fraccionamiento celular b.Criofractura c.Radioautografía d.Microscopía electrónica
4- En una muestra de macrófagos peritoneales obtenida de ratas desnutridas, se desea determinar las enzimas lisosomales. Para ello debemos aislar dichos organoides. ¿Cuál de las técnicas que se enuncian a continuación podría ser la adecuada ?.Marca la opción correcta.
	a. Criofractura b. Radioautografía c. Fraccionamiento celular d. Microscopía electrónica
5-De una muestra de sangre periférica, obtenida por punción venosa, se aislan los linfocitos obteniéndose solamente una cantidad limitada de los mismos, que no es suficiente para realizar un análisis cromosómico.¿Cuál de las técnicas que se enuncian a continuación podría ser la adecuada para obtener mayor número de linfocitos?.Marca la opción correcta.
	a. Criofractura b. Radioautografía c. Cultivo celular d. Fraccionamiento celular
6-Se desea determinar si el aminoácido leucina interviene en la síntesis de las enzimas pancreáticas. Para ello, a una muestra del aminoácido se marca con Tritio (elemento radiactivo), y se lo incorpora al medio de cultivo, en el que se hará desarrollar células pancreáticas de cerdo. Con cuál de las técnicas que se enuncian a continuacion es posible estudiar el recorrido de este aminoácido, dentro de la célula, determinando si forma parte de los gránulos de secreción de la célula en multiplicación. (marca la opción correcta)
	a. Criofractura b. Radioautografía c. Fraccionamiento celular d. Cultivo celular

B)Las células de los organismos pluricelulares están condenadas a vivir en comunidad y si son separadas del tejido, mueren. No obstante el hombre ha ideado técnicas "in vitro" que permiten no solo mantener vivas a las células aisladas, sino que también pueden reproducirse en el laboratorio mediante cultivos celulares. Estos se realizan en recipientes que aportan una superficie sólida a la cual las células se adhieren y que contienen un medio líquido con nutrientes, factores de crecimiento y otras sustancias necesarias. De esta manera se obtienen cantidades suficientes de células de un mismo tipo, lo que facilita el estudio de su estructura y ultraestructura por microscopía o de sus elementos subcelulares,que puede hacerse mediante diferentes técnicas que se enuncian a continuación :técnicas citoquímicas que permiten localizar un determinado tipo de moléculas , usando para ello reacciones coloreadas específicas de un determinado grupo químico . Fraccionamiento celular el fraccionamiento celular es el proceso físico en el cual se usa la fuerza centrífuga para separar organelas y componentes celulares como función de sus coeficientes de sedimentación.Con la centrifugación diferencial, los organelos celulares pueden ser aislados y sus funciones y composiciones químicas pueden ser determinados "in vitro".Autorradiografía: permite averiguar la localización precisa de moléculas marcadas con isótopos radiactivos suministrados previamente a la célula. Criofractura: se basa en un congelamiento rápido de la muestra celular con una posterior fractura. Se realiza un sombreado con platino, seguido por el agregado de una capa de carbono evaporado.Posibilita el estudio de la estructura molecular de diferentes membranas celulares.

	a. microscopio electrónico de transmisión b. microscopio de contraste de fase c. microscopio de fondo oscuro d. microscopio electrónico de barrido
9-¿ Cuál de las siguientes afirmaciones constituye una ventaja del microscopio de fluorescencia confocal, con respecto al de fluorescencia común?. Marca la opción correcta.
	a. Utiliza lentes de mayor aumento. b. Puede utilizarse para el estudio de células vivas. c. Brinda una imagen tridimensional de las estructuras observadas. d. Se puede emplear mayor número de colorantes fluorescentes
10-En esta microfotografía puede observarse una muestra de Tripanosoma cruzi ( agente etiológico de la enfermedad de Chagas), coloreados con Giemsa. ¿Con cuál de los microscopios enunciados a continuación fueron observados?. Marca la opción correcta.

a. microscopio óptico de campo claro

b. microscopio electrónico de barrido

c. microscopio de contraste de fase

d. microscopio de fluorescencia

11-En esta microfotografía se observa una muestra granos de polen tomados del aire ambiental. ¿Con cuál de los microscopios enunciados a continuación fueron observados?. Marca la opción correcta.

a. microscopio de contraste de fase

b. microscopio electrónico de barrido

c. microscopio de fondo oscuro

d. microscopio de fluorescencia

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BIBLIOGRAFIA Fundamentos de Biología Celular y Molecular - De Robertis-Hib- 3º edición- Editorial El Ateneo. Biología Celular y Molecular .De Robertis-Hib-Ponzio - 12° Edición - Editorial El Ateneo. Biología Molecular de la Célula - Alberts - 3° Edición - Editorial Omega La Célula - Cooper´s - 2° Edición - Editorial Marbán Biología Celular y Molecular - Lodish - 4° Edición - Editorial Panamericana.
	SITIOS WEB DE INTERES http://personales.mundivia.es/mggalvez/micro1.htm http://personales.mundivia.es/mggalvez/micro3.htm http://personales.mundivia.es/mggalvez/micro4.htm http://www.cellsalive.com/
Actualización: 1 de agosto de 2004

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